细胞质量决定实验的进程与结果,相信很多小伙伴在细胞培养上走了不少弯路,因为细胞一旦污染,大多数较难处理(只有扔)。由于细胞污染而耽误了实验进度,影响毕业和发文章进程的事件时常发生。
所以今天灵赋南宫28NG相信品牌力量整理了一下细胞培养过程中出现的一些现象与处理方法,了解到底哪里出了问题?下次应该怎么避免。学会对各种污染情况的辨别和处理是一项不可或缺的实验技能,希望大家在看完我们的文章后结合你的实验操作,学会如何应对细胞污染。
1.1、细菌污染
细菌污染最为常见,一旦操作稍有不当,就会引起细胞污染,细菌污染后显微镜下观察呈现球形、杆状等,其次,培养液发黄,变浑浊,还有异样气味发出,如下图所示:
处理方法:在培养基中加入抗生素处理,但是对细胞本身也有影响,状态会变差,所以,防范于未然,严格执行无菌操作规范,需要定期清理消毒培养设施。
1.2、真菌污染
真菌污染培养液清亮透明,不会像细菌感染大爆发,所以很难早期发现,镜下有时候呈现丝状、珊瑚状。
处理方法:赶紧扔掉,不要再想挽救。然后消毒灭菌细胞房,细胞培养箱,器皿等。
1.3、霉菌污染
培养液是清亮的,慢慢地出现絮状杂质,镜下可见呈细丝状的团状漂浮物,如同风中柳絮,一般不仔细看发觉不出来。细胞仍可生长,但时间一长,细胞的状态就变差,不再增长。
处理方法:建议果断舍弃该污染细胞,将环境彻底消毒,采用75%酒精擦洗一遍细胞培养箱,再用新洁尔灭擦洗一遍,把水盘里加上饱和量的硫酸铜。
1.4、支原体感染
支原体感染细胞以后,细胞病变不很明显,只是细胞状态变差、生长变慢,在显微镜下观察可能会有小黑点,但培养基一般不发生浑浊。细胞传代以后就出现细胞间黑点,细胞空泡化,很多类似凋亡、坏死的细胞,最终细胞漂浮,完全死亡。
处理方法:使用支原体清除培养基。
1.5、黑胶虫污染
显微镜下可见点状或片状游动小体,培养液也是不浑的,一般不会太影响,细胞还是可以用的。常常是细胞生长状态良好,且观测到的运动物无明显增多,且培养液颜色、透明度无明显变化,对细胞生长状态不会有明显影响,在细胞增殖旺盛之后会自然消失。
处理方法:使用黑胶虫去除剂,尽早处理细胞,越快越好。
2.1 污染原因一:培养箱太久没清洁
细胞污染了,不应该直接扔了培养皿就完事了;你还得看看这个细胞培养箱里其他培养皿是否污染,需要培养箱做个大扫除,重新酒精消毒,照紫外;半个月换一次细胞培养箱里的水,每次用酒精擦洗托盘。
(深圳灵赋南宫28NG相信品牌力量生物科技有限公司---细胞房设备)
2.2 污染原因二:超净台和桌面,清理不到位
(深圳灵赋南宫28NG相信品牌力量生物---细胞房设备)
超净台里不能堆放大量的培养皿、各种规格的板子、枪头等,防止紫外线照不到卫生死角,还会影响超净工作台里的气流稳定。细胞房里的桌面,切忌东西堆积如山。
2.3 污染原因三:细胞房人多,着装不规范
(深圳灵赋南宫28NG相信品牌力量生物---细胞房着装要求)
细胞房卫生要求很高,人多了,不确定因素多了。另外,要按要求合理着装。超净台做实验时,做试验时喜欢说话,殊不知你说话时的气体里面就有很多细菌呢,尽量不闲聊。
3:结语
细胞污染不易察觉,却是关乎我们实验成败的大事,越是需要我们日常的认真对待,相信以上对于细胞房常见污染物的鉴别和解决方案的制定,能帮助我们科研工作者解决细胞最重要的问题,如果您还是未找到问题所在,欢迎您留言,我们期待着为您解答。